في السنوات الأخيرة، ظهرت الأجسام النانوية كأدوات لا تقدر بثمن في مختلف المجالات البحثية والعلاجية بفضل حجمها الصغير وثباتها القوي، وخصوصيتها العالية. والجدير بالذكر أن عامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF) يُعدُّ منظماً أساسياً لتكوين الأوعية. ويلعب دوراً حيوياً محورياً في السرطان والحالات المرضية الأخرى. بالتالي، فإن تطوير الأجسام النانوية التي تستهدف VEGF قد حظي باهتمام كبير . مع ذلك، فإن طرق التعبير التقليدية للأجسام النانوية في الإشريكية القولونية غالباً ما تواجه تحديات ومشكلات مثل اختلال طي الأجسام النانوية، وانخفاض الإنتاجية، وعدم القابلية للذوبان واستجابة لهذه العقبات، برزت تقنية SUMO Fusion كإستراتيجية واعدة لتعزيز إنتاج الأجسام النانوية القابلة للذوبان في الإشريكية القولونية في هذا البحث قمنا بالتعبير والتنقية والتوصيف VHH المجال المتغير للأجسام المضادة ذات السلسلة (الثقيلة في نظام تعبير الإشريكية القولونية باستخدام شريك اندماج صغير متعلق باليوبيكويتين (SUMO). جرى استنساخ جين الاندماج - SUMO - active site) في ناقل التعبير - ونقله إلى E. coli سلالة codon B . جرى تحسین تعبیر VEvhh۱۰ باستخدام ٠.٥ ميلي مولار من الإيزوبروبيل بيتا-دي - ثيوجالاكتوبيرانوزيد (IPTG) لمدة ۲۲ ساعة عند ٢٥ درجة مئوية في محلول التريبتوزوم ( Luria لوحظ تعبير البروتين في شكل قابل للذوبان في %١٥ SDS-PAGE جرى جمع المحلول الطافي SUMOVE وتنقيته بوساطة تحليل كروماتوجرافي NI-NTA جرى تقييم النشاط البيولوجي لـ VEvhh۱۰ من خلال فحص ارتباطه بـ VEGF. يشير الارتباط الناجح لـ VEvhh١٠ مع VEGF إلى أنه يمكن استخدام هذا البروتين غير المندمج في التطبيقات التشخيصية العلاجية والسريرية المستقبلية.
Syrian Journal for Science and Innovation.
2024
الطلاب
الهيئة التعليمية
الخريجين
الكليات
