يتناول هذا العمل التحقق من صلاحية طريقة بسيطة باستخدام الفصل الكهربي الشعري (CZE) لاستخدامها في مراقبة جودة دفعات الإنترلوكين-7 البشري المؤتلف والمسكّر (rhIL-7) المنتجة في خلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO). تم استخدام محلول فصل مكوّن من 25 ملي مول من بورات الصوديوم عند pH 10 يحتوي على 12 ملي مول من ثنائي أمين البيوتان (DAB) كمادة طلاء ديناميكية للشعيرة. أتاحت هذه الطريقة فصل سبع قمم تمثل أنماطاً سكرية تتراوح من منخفضة إلى عالية التشبع بحمض السياليك.
وقد أُجريت دراسة موسعة حول طرق تهيئة الشعيرة لتحقيق نتائج قابلة للتكرار، حيث تم الحصول على قيم ممتازة لانحراف معيار التدفق الكهربي الانسيابي (EOF) (أقل من 0.6%) عند تضمين توازن الشعيرة تحت ظروف تحليل افتراضية وتخزينها في محلول 0.1 M NaOH طوال الليل. تم إثبات خصوصية الطريقة من خلال قدرتها على التمييز بين الأنماط السكرية المختلفة للـ rhIL-7 المنتجة في خلايا CHO عن مكونات الوسط الصيغوي.
تم إثبات الخطية ضمن مجال تركيز يتراوح بين 0.5 و4 ملغ/مل، وكان حد التكميم (LOQ) هو 0.5 ملغ/مل. أظهرت الطريقة تكرارية جيدة (RSD < 1.4% و3.3% لزمن الهجرة tm والنسبة المئوية للمساحة A% على التوالي)، كما كانت الدقة المتوسطة بين الأيام (RSD < 2.1% و4.5%)، وبين المحللين (RSD < 2.0% و3.0%)، وبين الأجهزة المختلفة (RSD < 3.8% و3.7% للحركة الكهربائية والمساحة النسبية A% على التوالي) جميعها ضمن الحدود المقبولة.
كشفت دراسة المتانة أن قيمة pH وتركيز DAB هما من العوامل الحاسمة في الطريقة، في حين أن التغير الطفيف في القوة الأيونية للمحلول الإلكتروليتي أو تغيير مصدر الشعيرة لم يؤثر على النتائج. وأخيراً، أثبتت الطريقة قدرتها على توفير معلومات موثوقة لدعم دراسات المقارنة وضمان التوافق بين دفعات الإنتاج المختلفة للـ rhIL-7 المصنع حيوياً.
Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis.
2010.